無血清培養(yǎng)基的優(yōu)缺點
無血清培養(yǎng)基的優(yōu)點:
1.可避免血清批次間的質(zhì)量變動,提高細(xì)胞培養(yǎng)和實驗結(jié)果的重復(fù)性。
2.避免血清對細(xì)胞的毒性作用和血清源性污染。
3.避免血清組分對實驗研究的影響。
4.有利于體外培養(yǎng)細(xì)胞的分化。
5.可提高產(chǎn)品的表達(dá)水平并使細(xì)胞產(chǎn)品易于純化。
6.組分穩(wěn)定,可大量生產(chǎn)。
7.不含有絲分裂原抑制劑,可以促進(jìn)細(xì)胞增殖。
無血清培養(yǎng)基的缺點:
1.細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基中易受某些機(jī)械因素和化學(xué)因素的影響,培養(yǎng)基的保存和應(yīng)用不 如傳統(tǒng)的合成培養(yǎng)基方便。
2.成本較高。
3.針對性很強(qiáng),一種無血清培養(yǎng)基僅適合某一類細(xì)胞的培養(yǎng)。
4.處于發(fā)育的不同分化階段的細(xì)胞(例如干細(xì)胞與定向前體細(xì)胞相比)需要不同的配方,對生長因子和細(xì)胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時,也去除了一些血清蛋白具有的保護(hù)、解毒作用,因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。
目前,無血清培養(yǎng)基的研究有兩個方向:一是培養(yǎng)基中不含有任何動物來源的添加組分;二是培養(yǎng)基中不含有不明確的添加組分。依此可以將當(dāng)前應(yīng)用較多的無血清培養(yǎng)基歸納為以下四種:
1.一般意義上的無血清培養(yǎng)基,用各類可代替血清功能的生物材料配制細(xì)胞培養(yǎng)基,如牛血清白蛋白(BSA),轉(zhuǎn)鐵蛋白,胰島素等生物大分子物質(zhì),以及從血清中提取的去除蛋白質(zhì)的混合脂類以及水解蛋白等。其特點是培養(yǎng)基中的蛋白含量較高,添加物質(zhì)的化學(xué)成分不明確,其中含有大量的動物來源蛋白。
2.無動物來源培養(yǎng)基:許多商業(yè)公司開發(fā)的無動物來源培養(yǎng)基是基于生產(chǎn)重組藥物的安全考慮,培養(yǎng)基中的添加組分無動物來源,需要的蛋白來源于重組蛋白或者蛋白水解物,這些組分可以保障細(xì)胞生長及增殖的需要。
3.無動物蛋白培養(yǎng)基:培養(yǎng)基*不用動物來源的蛋白,但仍有部分添加物是來源于植物蛋白的水解片段或合成多肽片段等其他衍生物。此類培養(yǎng)基組分相對穩(wěn)定,但必須添加類固醇激素和脂類前體,并且對培養(yǎng)的細(xì)胞是高度特異性的。
4.化學(xué)組分限定培養(yǎng)基,此類無血清培養(yǎng)基是目前zui安全的,zui為理想的培養(yǎng)基,首先可以保證培養(yǎng)基批次間的一致性,其中所添加的少量動物來源的蛋白水解物、蛋白都是成分明確的組分。其特點是培養(yǎng)基的性質(zhì)確定,配起培養(yǎng)基來也比較方便。