無血清培養(yǎng)基由營養(yǎng)*的基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加激素,生長因子,貼壁因子和結(jié)合蛋白而組成。
(一)基礎(chǔ)培養(yǎng)基
早期用于細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基有血漿凝塊,淋巴液,大豆蛋白胨和胚胎浸膏等天然培養(yǎng)基。1950年Morgan等在前人的研究基礎(chǔ)上研究出199培養(yǎng)基,是動物細(xì)胞培養(yǎng)基發(fā)展到一個嶄新的階段,及合成培養(yǎng)基階段。合成培養(yǎng)基是按細(xì)胞生長需要將一定比例的氨基酸、維生素、無機鹽、葡萄糖等組合成的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。目前市場上已經(jīng)有上百種的合成培養(yǎng)基商品。在眾多的合成培養(yǎng)基中,MEM、DMEM、RPMI 1640、F12、和TC100的使用。
基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成分是*已知的,因此在無血清培養(yǎng)基對不同的細(xì)胞株進行培養(yǎng)時可以對基礎(chǔ)培養(yǎng)基的某些組分進行相應(yīng)的調(diào)整,以更好的符合細(xì)胞株的營養(yǎng)要求或提高目的蛋白的表達(dá)量。
(二)主要添加因子
又稱補充因子,是代替血清的各種因子的總稱。多數(shù)無血清培養(yǎng)基必須補加3—8種因子,任何單一因子都不能取代血清。已知有100多種此類因子,其中有些是必須補充因子,如胰島素、亞硒酸鈉和轉(zhuǎn)鐵蛋白,其他多數(shù)為輔助作用的因子。